Fangaska qaraxa bariiska ee Kosakonia oryziphila NP19 waxaa loo isticmaali karaa sidii kor u qaadiye koritaanka dhirta iyo sunta cayayaanka bayoolojiga si loo xakameeyo qaraxa bariiska ee noocyada KDML105.

Daraasaddani waxay muujinaysaa in fangaska isku-dhafan ee rhizosphere *Kosakonia oryziphila* NP19 oo laga soocay xididdada bariiska uu yahay dilaaga dhirta ee rajo leh oo kobciya koritaanka dhirta iyo sunta cayayaanka si loo xakameeyo qaraxa bariiska ee uu sababo *Pyricularia oryzae*. Tijaabooyin In vitro ah ayaa lagu sameeyay caleemo cusub oo geedo bariis jasmine ah oo nooca Khao Dawk Mali 105 (KDML105). Natiijooyinka waxay muujiyeen in NP19 si wax ku ool ah u joojisay biqilka *Pyricularia oryzae* conidia. Cudurka *Pyricularia oryzae* waxaa la joojiyay saddex xaaladood oo daaweyn oo kala duwan: marka hore, bariiska waxaa lagu gumeystay NP19 waxaana lagu tallaalay *Pyricularia oryzae* conidia; marka labaad, isku darka NP19 iyo *Pyricularia oryzae* conidia ayaa lagu mariyay caleemaha;
Bakteeriyada rhizosphere *Kosakonia oryziphila* NP19¹⁴waxaa laga soocay xididdada bariiska (*Oryza sativa* L. cv. RD6). *Kosakonia oryziphila* NP19 waxay leedahay sifooyin kor u qaada koritaanka dhirta, oo ay ku jiraan hagaajinta nitrogen, soo saarista indoleacetic acid (IAA), iyo milmida fosfate. Waxaa xiiso leh, *Kosakonia oryziphila* NP19 waxay soo saartaa chitinase^14.Isticmaalka *Kosakonia oryziphila* NP19 ee iniinaha bariiska ee KDML105 ayaa wanaajiyay badbaadada bariiska ka dib markii uu ku dhacay cudurka bariiska. Ujeeddada daraasaddan ayaa ah in (i) la caddeeyo habka xakamaynta ee *Kosakonia oryziphila* NP19 ee ka dhanka ah qaraxa bariiska iyo (ii) la baaro saameynta *Kosakonia oryziphila* NP19 ee xakamaynta qaraxa bariiska.

Nafaqooyinku waxay door muhiim ah ka ciyaaraan koritaanka iyo horumarka dhirta, iyagoo u adeegaya arrimo xakameynaya cudurrada kala duwan ee bakteeriyada. Nafaqada macdanta ee dhirta waxay go'aamisaa iska caabbinta cudurka, astaamaha qaab-dhismeedka ama unugyada, iyo firfircoonida, ama awoodda ay u leedahay inay ka badbaado jeermiska. Fosfooraska wuxuu gaabin karaa horumarka wuxuuna yareyn karaa darnaanta qaraxa bariiska isagoo kordhinaya isku-darka isku-dhafka phenolic. Potassium guud ahaan wuxuu yareeyaa dhacdooyinka cudurrada badan ee bariiska, sida qaraxa bariiska, barta caleenta bakteeriyada, barta qolofta caleenta, qudhunka jirridda, iyo barta caleenta. Daraasad uu sameeyay Perrenoud ayaa muujisay in bacriminta potassium-ta badan ay sidoo kale yareyn karto dhacdooyinka cudurrada fangaska ee bariiska iyo kordhinta wax-soo-saarka. Daraasado badan ayaa muujiyay in bacriminta sulfur ay hagaajin karto iska caabbinta dalagga ee cudurada fangaska.²⁷Magnesium xad dhaaf ah (qayb ka mid ah chlorophyll) waxay keeni kartaa qarax bariis ah.²¹Zinc wuxuu si toos ah u dili karaa jeermiska, taasoo yareyneysa darnaanta cudurka.²²Tijaabooyinka goobta ayaa muujiyay in inkastoo heerarka fosfoorasyada, potassium-ka, sulfur-ka, iyo zinc ee ciidda goobta ay ka sarreeyeen tijaabadii dheriga, haddana qaraxa bariiska ayaa wali ku faafay caleenta bariiska. Nafaqooyinka ciidda waxaa laga yaabaa inaysan aad waxtar ugu lahayn xakamaynta qaraxa bariiska, maadaama qoyaanka iyo heerkulkuba aysan ku habboonayn cayayaanka xooggan ee faafa.
Tijaabooyinka goobta, Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnamiensis iyo C. gleum ayaa lagu ogaaday dhammaan daawaynta. Stenotrophomonas maltophilia waxaa laga soocay rhizosphere-ka sarreenka, boorashka, qajaarka, galleyda, iyo baradhada waxayna muujisay xakamaynta bayoolojiga.^dhaqdhaqaaqka dhanka ah Colletotrichum nymphaeae.28 Intaa waxaa dheer, P. dispersa ayaa la sheegay inay waxtar u leedahay ka dhanka ah madowga.^qudhunBaradho macaan.29 Intaa waxaa dheer, nooca R1 ee Xanthomonas sacchari wuxuu muujiyay dhaqdhaqaaq ka soo horjeeda qaraxa bariiska iyo qudhunka panicle-ka oo ay keento Burkholderia.^glumae.30Burkholderia oryzae NP19 waxay abuuri kartaa xiriir isku mid ah oo lala yeesho unugyada bariiska inta lagu jiro biqilka waxayna noqon kartaa fungus isku mid ah oo ku baahsan noocyada bariiska qaarkood. Iyadoo bakteeriyada kale ee carrada ay gumeysan karaan bariiska ka dib tallaalka, fangaska qaraxa NP19, marka la gumeysto, wuxuu saameeyaa arrimo badan oo ku jira habka difaaca bariiska ee ka dhanka ah cudurkan. NP19 ma aha oo kaliya inuu joojiyo koritaanka P. oryzae in ka badan 50% (fiiri Jadwalka Dheeraadka ah ee S1 ee ku jira lifaaqa khadka tooska ah), laakiin sidoo kale wuxuu yareeyaa tirada nabarrada qaraxyada ee caleenta wuxuuna kordhiyaa wax soo saarka bariiska lagu tallaalay ama lagu gumeystay NP19 (RBf, RFf-B, iyo RBFf-B) tijaabooyinka goobta (Jaantuska S3).
Fangaska Pyricularia oryzae, oo sababa qaraxyada dhirta, waa fangaska hemittrophic kaas oo u baahan nafaqooyin ka yimaada geedka martida loo yahay inta lagu jiro caabuqa. Dhirtu waxay soo saartaa noocyada oksijiinta ee falcelinta leh (ROS) si loo xakameeyo caabuqa fangaska; si kastaba ha ahaatee, Pyricularia oryzae waxay isticmaashaa xeelado kala duwan si ay uga hortagto ROS-ka martida loo yahay soo saaro.³¹Peroxidases waxay u muuqataa inay door ka ciyaaraan iska caabbinta cudur-sidaha, oo ay ku jiraan isku-xidhka borotiinka derbiga unugyada, dhumucda derbiyada xylem, soo saarista ROS, iyo dhexdhexaadinta hydrogen peroxide.³²Ensaymada antioxidant-ka waxay u adeegi karaan sidii nidaam gaar ah oo lagu baadho ROS. Iyada oo loo marayo sifooyinkooda antioxidant-ka, superoxide dismutase (SOD) iyo peroxidase (POD) waxay gacan ka geystaan ​​​​bilaabidda jawaab celinta difaaca, iyadoo SOD ay u adeegto safka koowaad ee difaaca.³³Bariiska, firfircoonida peroxidase-ka dhirta waxaa sababa ka dib marka uu ku dhaco jeermiska dhirta sida *Pyricularia oryzae* iyo *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae*.³²Daraasaddan, dhaqdhaqaaqa peroxidase wuxuu ku kordhay bariiska la gumeystay iyo/ama lagu tallaalay *Magnaporthe oryzae* NP19; si kastaba ha ahaatee, *Magnaporthe oryzae* saameyn kuma yeelan dhaqdhaqaaqa peroxidase. Superoxide dismutase (SOD), sida H₂O₂ synthase, wuxuu kiciyaa dhimista O₂⁻ ilaa H₂O₂. SOD waxay door muhiim ah ka ciyaartaa iska caabbinta dhirta ee walbahaarka kala duwan iyadoo dheellitiraysa isku-darka H₂O₂ gudaha geedka, taasoo kor u qaadaysa dulqaadka dhirta ee walbahaarka kala duwan³⁴. Daraasaddan, tijaabada dheriga, 30 maalmood ka dib tallaalka *Magnaporthe oryzae* (30 DAT), hawlaha SOD ee kooxaha RF iyo RBF waxay ahaayeen 121.9% iyo 104.5% ka sarreeya kuwa kooxda R, siday u kala horreeyaan, taasoo muujinaysa jawaab celin SOD ah oo ku saabsan caabuqa *Magnaporthe oryzae*. Tijaabooyinka dheriga iyo goobta labadaba, hawlaha SOD ee bariiska *Magnaporthe oryzae* ee lagu tallaalay NP19 waxay ahaayeen 67.7% iyo 28.8% ka sarreeya kuwa bariiska aan la tallaalin 30 maalmood ka dib tallaalka, siday u kala horreeyaan. Jawaabaha kiimikada ee dhirta waxaa saameeya deegaanka, isha cadaadiska, iyo nooca dhirta³⁵. Hawlaha ensaymka oksaydhka dhirta waxaa si toos ah u saameeya arrimaha deegaanka, kuwaas oo iyaguna saameeya hawlaha ensaymka oksaydhka dhirta iyagoo beddelaya bulshada microbial-ka dhirta.
Fangaska cudurka qarxinta bariiska (Kosakonia oryziphila NP19, lambarka gelitaanka NCBI PP861312) ee loo adeegsaday daraasaddan wuxuu ahaa nooc¹³Laga soocay xididdada noocyada bariiska ee RD6 ee Gobolka Nakhon Phanom, Thailand (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E). Noocan waxaa lagu beeray maraq nafaqo leh (NB) heerkul ah 30°C iyo 150 rpm muddo 18 saacadood ah. Si loo xisaabiyo heerka bakteeriyada, nuugista joojinta bakteeriyada ee 600 nm ayaa la cabbiray. Xoogga joojinta bakteeriyada waxaa loo hagaajiyay^10⁶CFU/mL oo leh biyo nadiif ah oo la baabi'iyay (_dH₂O). Fangaska qaraxa bariiska (Pyricularia oryzae) ayaa lagu tallaalay dhibco ahaan agar baradho ah oo dextrose ah (PDA) waxaana lagu kululeeyay 25°C muddo 7 maalmood ah. Mycelium-ka fangaska waxaa loo wareejiyay agar bariis ah oo dhexdhexaad ah (2% (w/v) bran bran, 0.5% (w/v) sucrose, iyo 2% (w/v) agar oo lagu milmay biyo la miiray, pH 7) waxaana lagu kululeeyay 25°C muddo 7 maalmood ah. Caleen la nadiifiyay oo ah nooc bariis ah oo u nugul (KDML105) ayaa la saaray mycelium si loo kiciyo conidia waxaana lagu kululeeyay 25°C muddo 5 maalmood ah iyadoo la isku daray iftiinka UV iyo caddaanka. Conidia waxaa la ururiyay iyadoo si tartiib ah loo tirtirayo mycelium-ka iyo dusha sare ee caleenta cudurka qabta iyadoo la isticmaalayo 10 ml oo ah xal 0.025% (v/v) Tween 20 ah oo la nadiifiyay. Xalka fangaska waxaa lagu sifeeyay siddeed lakab oo maro farmaajo ah si looga saaro mycelium, agar, iyo caleenta bariiska. Fiirsashada konidia ee joojinta waxaa loo hagaajiyay 5 × 10⁵ konidia/ml si loo sameeyo falanqayn dheeraad ah.
Dhaqamada cusub ee unugyada Kosakonia oryziphila NP19 waxaa lagu diyaariyey iyadoo lagu beerayo meel dhexdhexaad ah oo NB ah 37 °C muddo 24 saacadood ah. Ka dib markii la centrifugation (3047 × g, 10 daqiiqo), pellet-ka unugyada ayaa la ururiyay, laba jeer ayaa lagu dhaqay 10 mM oo ah saline phosphate-buffered (PBS, pH 7.2), ka dibna dib loogu celiyey isla kaydka. Cufnaanta indhaha ee joojinta unugyada waxaa lagu cabbiray 600 nm, iyadoo la helay qiime qiyaastii 1.0 ah (oo u dhiganta 1.0 × 10⁷ CFU/μl oo lagu go'aamiyay dahaadhka saxannada nafaqada ee agar). Conidia ee P. oryzae waxaa lagu helay iyadoo lagu daadiyo xalka PBS oo lagu tiriyo iyadoo la isticmaalayo hemocytometer. Joojinta *K. oryziphila* NP19 iyo *P. Tijaabooyinka caleenta lagu sameeyay, K. oryziphila* conidia waxaa lagu diyaariyey caleemo bariis cusub oo leh xoog dhan 1.0 × 10⁷ CFU/μL iyo 5.0 × 10² conidia/μL, siday u kala horreeyaan. Habka diyaarinta muunadda bariiska wuxuu ahaa sidan soo socota: caleemo dhererkoodu yahay 5 cm oo laga soo jaray geedo bariis ah ayaa la jaray oo lagu dhejiyay suxuunta Petri oo lagu dahaadhay warqad nuugaysa oo qoyan. Shan kooxood oo daaweyn ah ayaa la sameeyay: (i) R: caleemo bariis ah oo aan lahayn tallaal bakteeriya ah oo xakameyn ah, oo lagu daray 0.025% (v/v) Xalka Tween 20; (ii) RB + F: bariis lagu tallaalay K. oryziphila NP19, oo lagu daray 2 μL oo ah joojinta conidia ee fangaska oo sababay qaraxa bariiska; (iii) R + BF: Bariis kooxda R ah oo lagu daray 4 μl oo isku dar ah joojinta fungal conidia iyo K. oryziphila NP19 (saamiga mugga 1:1); (iv) R + F: Bariis kooxda R ah oo lagu daray 2 μl oo ah joojinta fungal conidia; (v) RF + B: Bariis kooxda R ah oo lagu daray 2 μl oo joojinta fungal conidia ah ayaa lagu daray 30 saacadood, ka dibna 2 μl oo K. oryziphila NP19 ah ayaa lagu daray isla meeshaas. Dhammaan suxuunta Petri waxaa lagu kululeeyay 25°C mugdiga muddo 30 saacadood ah ka dibna waxaa la dhigay iftiin joogto ah. Koox kasta waxaa loo sameeyay saddex-laab. Ka dib 72 saacadood oo la beeray, unugyada dhirta waxaa la arkay oo lagu falanqeeyay iyadoo la sawirayo microscopy elektaroonig ah (SEM). Si kooban, unugyada dhirta waxaa lagu dhejiyay kaydka fosfate oo ka kooban 2.5% (v/v) glutaraldehyde waxaana lagu qalajiyay iyada oo loo marayo taxane xalal ethanol ah. Ka dib markii lagu qalajiyo dhibic muhiim ah oo lagu qalajiyo kaarboon laba ogsaydh, muunadaha waxaa lagu dahaadhay dahab ugu dambayntiina waxaa la baaray iyadoo la isticmaalayo mikroskoob elektaroonig ah oo sawiraya.¹⁵