borotiinada DELLA waa la xafidaynidaamiya koritaankakuwaas oo kaalin dhexe ka ciyaara horumarinta dhirta si ay uga jawaabaan calaamadaha gudaha iyo dibadda. Nidaamiyeyaal qoraal ahaan ahaan, DELLAs waxay ku xidhan yihiin qodobbada qoraalka (TFs) iyo histone H2A iyadoo la sii marinayo xayndaabkooda GRAS waxaana loo shaqaaleysiiyay inay wax ka qabtaan dhiirrigeliyeyaasha. Daraasadihii ugu dambeeyay waxay muujiyeen in xasilloonida DELLA lagu nidaamiyo turjumaadda ka dib laba hab: polyubiquitination oo ay keentay hormoonka dhirtagibberellin, taas oo u horseedaysa hoos u dhacooda degdega ah, iyo isku-xidhka wax-bedelka ubiquitin-sida yar yar (SUMO), taas oo kordhisa ururintooda. Waxaa intaa dheer, dhaqdhaqaaqa DELLA waxaa si firfircoon u habeeya laba hab oo kala duwan oo glycosylation ah: O-fucosylation waxay wanaajisaa isdhexgalka DELLA-TF, halka O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) wax ka beddelka ay joojiso isdhexgalka DELLA-TF. Si kastaba ha ahaatee, doorka phosphorylation DELLA ma cadda sida daraasadihii hore ay muujiyeen natiijooyin is khilaafsan, iyadoo qaar ay soo jeedinayaan in fosforyaalku ay kor u qaadaan ama ay xakameeyaan xaalufka DELLA iyo kuwa kale oo soo jeedinaya in fosforyaalku aysan saameyn ku yeelan xasilloonidooda. Halkan, waxaan ku aqoonsaneynaa goobaha fosforyaalka ee GA1-3 cadaadisiyaha (RGA), AtDELLA, oo laga nadiifiyey Arabidopsis thaliana iyadoo la adeegsanayo spectrometry mass spectrometry waxayna tuseysaa in fosforyaalka laba peptides ee RGA ee gobolada PolyS iyo PolyS/T ay kor u qaadaan dhaqdhaqaaqa RGA iyada oo kor u qaadeysa isku xirnaanta H2A iyo ururka RGA ee dhiirigeliyayaasha. Waxaa xusid mudan, fosforyaalku wax saameyn ah kuma yeelan isdhexgalka RGA-TF ama xasilloonida RGA. Daraasadayadu waxay daaha ka qaadaysaa habka molecular kaas oo fosforyaalku uu kiciyo dhaqdhaqaaqa DELLA.
Falanqayntayada cabbiraadda baaxadda leh waxay daaha ka qaaday in Pep1 iyo Pep2 labaduba ay ahaayeen kuwo aad u sarreeya oo fosforyaal ah oo ku jira RGA ee asalka GA-deficient Ga1. Marka lagu daro daraasaddan, daraasaadka fosfooraska ayaa sidoo kale shaaca ka qaaday fosforyaalka Pep1 ee RGA, inkasta oo doorkeeda aan weli la darsin53,54,55. Taas bedelkeeda, Phosphorylation Pep2 hore looma sifeyn tan iyo peptide-kan waxaa lagu ogaan karaa oo keliya iyadoo la isticmaalayo RGAGKG transgene. In kasta oo beddelka m1A, kaas oo baabi'iyay fosforyaalka Pep1, uu wax yar ka yareeyay dhaqdhaqaaqa RGA ee planta, waxay yeelatay saameyn wax lagu daro marka lagu daro m2A si loo yareeyo dhaqdhaqaaqa RGA (Jaantuska Dheeraadka 6). Muhiimad ahaan, Phosphorylation Pep1 ayaa si weyn hoos loogu dhigay GA-kobciyay sly1 mutant marka la barbar dhigo ga1, oo soo jeedinaya in GA kor u qaado dephosphorylation RGA, hoos u dhigista hawsheeda. Habka GA uu ku xakameeyo fosforyaalka RGA wuxuu u baahan yahay baaritaan dheeraad ah. Mid ka mid ah suurtogalnimada ayaa ah in tan lagu gaaro nidaaminta kinase borotiinka aan la aqoonsan. Inkasta oo daraasaduhu ay muujiyeen in muujinta borotiinka CK1 kinase EL1 uu hoos u dhigay GA ee bariiska41, natiijooyinkayagu waxay muujinayaan in isbeddellada sare ee Carabidopsis EL1 homologue (AEL1-4) aysan hoos u dhigin fosforyaalka RGA. Annaga oo ku heshiinayna natiijadeenna, cilmi-baaris fosfooproteomic ah oo dhowaan la adeegsaday iyadoo la adeegsanayo Arabidopsis AEL khadadka xad-dhaafka ah iyo ael saddex-geesoodka ah ma aqoonsanin wax borotiinno ah oo DELLA ah oo ka kooban kinases56. Markii aan diyaarinay qoraal-gacmeedka, waxaa la sheegay in GSK3, hiddo-wadaha ku dhejinaya GSK3/SHAGGY-sida kinase ee sarreenka (Triticum aestivum), uu fosforyaal saari karo DELLA (Rht-B1b)57, inkastoo fosforyaalka Rht-B1b ee GSK3 aan lagu xaqiijin dhirta. Dareen-celinta enzymatic vitro ee joogitaanka GSK3 oo ay ku xigto falanqaynta spectrometry mass ayaa shaaca ka qaaday saddex goobood oo fosforyaal ah oo ku yaal inta u dhaxaysa DELLA iyo GRAS domains ee Rht-B1b (Jaantuska Dheeraadka ah 3). Beddelka Serine ilaa alanine ee dhammaan saddexda goobood ee fosforyaalka waxay keentay hoos u dhaca dhaqdhaqaaqa Rht-B1b ee sarreenka transgenic, si waafaqsan natiijooyinkayada in beddelka alanine ee Pep2 RGA ay hoos u dhigtay dhaqdhaqaaqa RGA. Si kastaba ha ahaatee, imtixaanada hoos u dhaca borotiinka ee vitro ayaa si dheeraad ah u muujiyay in fosforyaalku ay sidoo kale xasilin karto Rht-B1b57. Tani waxay ka duwan tahay natiijooyinkayada muujinaya in beddelka alanine ee Pep2 RGA aysan wax ka beddelin xasilloonida Planta. GSK3 ee sarreenku waa ortholog of brassinosteroid-insensitive protein 2 (BIN2) ee Arabidopsis 57. BIN2 waa maamulaha taban ee calaamadaynta BR, iyo BR waxay kicisaa dariiqa calaamadaynta iyada oo keenaysa hoos u dhaca BIN2 58. Waxaan tusnay in daawaynta BR aysan hoos u dhigin RGA-ga 59 ama fosfooraska 2 waxay soo jeedinaysaa in heerka hoose ee RGA lagama yaabo in fosforyl ay BIN2 ku shubto.
Dhammaan xogta tiro-koobsi ahaan ayaa loo falanqeeyay iyadoo la isticmaalayo Excel, kala duwanaanshiyaha weyna waxaa lagu go'aamiyay iyadoo la isticmaalayo t-tijaabka Ardayga. Hababka tirakoobka looma isticmaalin si horay loo go'aamiyo cabbirka muunadda. Wax xog ah lagama saarin falanqaynta; tijaabadu lama kala soocnayn; iyo cilmi-baarayaashu waxay ka warqabeen qoondaynta inta lagu jiro tijaabada iyo qiimeynta natiijada. Cabbirrada tusaalaha waxaa lagu bixiyaa halyeyga shaxanka iyo faylalka xogta cayriin.
Waqtiga boostada: Abriil-15-2025