baaritaanbg

Fosforylation-ku wuxuu kiciyaa habeeyaha koritaanka sare ee DELLA, isagoo kor u qaadaya isku xidhka histone H2A ee chromatin ee Arabidopsis.

Borotiinnada DELLA waa la ilaaliyaanidaamiyayaasha koritaankakuwaas oo door muhiim ah ka ciyaara horumarinta dhirta iyagoo ka jawaabaya calaamadaha gudaha iyo dibadda. Maadaama ay yihiin nidaamiyeyaasha qoraalka, DELLAs waxay ku xidhmaan arrimaha qoraalka (TFs) iyo histone H2A iyada oo loo marayo domains-kooda GRAS waxaana loo shaqaaleeyaa inay ka shaqeeyaan dhiirrigeliyeyaasha. Daraasado dhowaan la sameeyay ayaa muujiyay in xasilloonida DELLA lagu xakameeyo turjumaadda kadib laba hab: polyubiquitination oo ay keento hoormoonka dhirta.gibberellin, taasoo horseedaysa burbur degdeg ah, iyo isku-xidhka wax-ka-beddeleyaal yar oo ubiquitin u eg (SUMO), kaas oo kordhiya ururintooda. Intaa waxaa dheer, dhaqdhaqaaqa DELLA waxaa si firfircoon u nidaamiya laba hab oo glycosylation ah oo kala duwan: O-fucosylation waxay xoojisaa isdhexgalka DELLA-TF, halka wax-ka-beddelka O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) uu joojiyo isdhexgalka DELLA-TF. Si kastaba ha ahaatee, doorka fosforylation-ka DELLA ma cadda maadaama daraasado hore ay muujiyeen natiijooyin is khilaafsan, iyadoo qaar ay soo jeedinayaan in fosforylation-ku uu kor u qaado ama uu caburiyo burburka DELLA kuwa kalena ay soo jeedinayaan in fosforylation-ku uusan saameyn ku yeelan xasilloonidooda. Halkan, waxaan ku aqoonsaneynaa goobaha fosforylation-ka ee ku jira GA1-3 repressor (RGA), AtDELLA, oo laga nadiifiyay Arabidopsis thaliana iyadoo la adeegsanayo spectrometry-ga tirada badan waxayna muujineysaa in fosforylation-ka laba peptides-ka RGA ee gobollada PolyS iyo PolyS/T uu kor u qaado dhaqdhaqaaqa RGA isagoo kor u qaadaya isku xidhka H2A iyo xiriirka RGA ee lala yeesho dhiirrigeliyeyaasha bartilmaameedka ah. Si gaar ah, fosforylation-ku ma saameyn isdhexgalka RGA-TF ama xasilloonida RGA. Daraasaddeennu waxay muujinaysaa hab molecular ah oo fosforyaalku ku kiciyo dhaqdhaqaaqa DELLA.
Falanqayntayada cufnaanta ee spectrometric-ka ayaa muujisay in Pep1 iyo Pep2 labaduba si weyn loogu shubay RGA asalka Ga1 ee aan lahayn GA. Intaa waxaa dheer, daraasadaha phosphoproteomic-ka ayaa sidoo kale shaaca ka qaaday fosfoorasaydhka Pep1 ee RGA, inkastoo doorkeeda aan weli la baran53,54,55. Taas bedelkeeda, fosfoorasaydhka Pep2 hore looma sharxin maadaama peptide-kan lagu ogaan karo oo keliya iyadoo la adeegsanayo transgene-ka RGAGKG. Inkasta oo isbeddelka m1A, kaas oo baabi'iyay fosfoorasaydhka Pep1, uu yaraaday dhaqdhaqaaqa RGA ee planta, waxay lahayd saameyn dheeraad ah markii lagu daray m2A si loo yareeyo dhaqdhaqaaqa RGA (Jaantuska Dheeraadka ah 6). Muhiimad ahaan, fosfoorasaydhka Pep1 si weyn ayaa loogu yareeyay mutant-ka sly1 ee GA-ga la xoojiyay marka la barbar dhigo ga1, taasoo soo jeedinaysa in GA ay kor u qaaddo dephosphorylation-ka RGA, taasoo yareysa waxqabadkeeda. Habka uu GA u xakameeyo fosfoorasaydhka RGA wuxuu u baahan yahay baaritaan dheeraad ah. Hal suurgal ayaa ah in tan lagu gaaro iyada oo loo marayo nidaaminta kinase borotiin aan la garanayn. In kasta oo daraasaduhu muujiyeen in muujinta borotiinka CK1 kinase EL1 uu hoos u dhigayo GA bariiska41, natiijooyinkayagu waxay muujinayaan in isbeddellada heerka sare ah ee isku-dhafka ah ee Arabidopsis EL1 (AEL1-4) aysan yareyn fosfoorasaydhka RGA. Iyada oo la raacayo natiijooyinkeenna, daraasad dhowaan la sameeyay oo lagu sameeyay phosphoproteomic oo adeegsanaysa khadadka xad-dhaafka ah ee Arabidopsis AEL iyo mutant saddex-geesood ah oo ael ah ma aysan aqoonsan wax borotiin ah oo DELLA ah oo ah substrate-yada kinases-kan56. Markii aan diyaarinay qoraalka, waxaa la soo sheegay in GSK3, oo ah hidda-wadaha ku jira kinase GSK3/SHAGGY-sida ee sarreenka (Triticum aestivum), uu fosfoorasaydh ka dhigi karo DELLA (Rht-B1b)57, inkastoo fosfoorasaydhka Rht-B1b ee GSK3 aan la xaqiijin in planta. Falcelinta enzymatic-ka ee vitro iyadoo ay weheliso GSK3 oo ay ku xigto falanqaynta spectrometry-ga tirada ayaa shaaca ka qaaday saddex goobood oo fosfoorasaydh ah oo ku yaal inta u dhaxaysa qaybaha DELLA iyo GRAS ee Rht-B1b (Jaantuska Dheeraadka ah 3). Beddelka Serine ilaa alanine ee dhammaan saddexda goobood ee fosfoorasaydhka wuxuu keenay hoos u dhac ku yimaada dhaqdhaqaaqa Rht-B1b ee sarreenka transgenic, taasoo la jaanqaadaysa natiijooyinkayaga in beddelka alanine ee Pep2 RGA uu hoos u dhigay dhaqdhaqaaqa RGA. Si kastaba ha ahaatee, tijaabooyinka burburka borotiinka ee vitro waxay sii muujiyeen in fosfoorasaydhka uu sidoo kale xasilin karo Rht-B1b57. Tani waxay ka duwan tahay natiijooyinkayaga oo muujinaya in beddelka alanine ee Pep2 RGA aysan beddelin xasilloonidiisa planta. GSK3 ee sarreenka waa ortholog ee borotiinka brassinosteroid-aan xasaasiyad lahayn 2 (BIN2) ee Arabidopsis 57. BIN2 waa nidaamiye taban oo calaamadaynta BR ah, BR-na wuxuu dhaqaajiyaa marinkiisa calaamadaynta isagoo sababaya burburka BIN2 58. Waxaan tusnay in daaweynta BR aysan yareyn xasilloonida RGA 59 ama heerarka fosfoorasaydhka ee Arabidopsis (Jaantuska Dheeraadka ah 2), taasoo soo jeedinaysa in RGA aysan u badnayn in BIN2 lagu daro fosfoorasaydhka.
Dhammaan xogta tirada waxaa lagu falanqeeyay tirakoob ahaan iyadoo la adeegsanayo Excel, kala duwanaansho muhiim ahna waxaa lagu go'aamiyay iyadoo la adeegsanayo imtixaanka t-test ee Ardayga. Ma jirin habab tirakoob oo loo isticmaalay in lagu go'aamiyo cabbirka muunadda kahor. Ma jirin xog laga saaray falanqaynta; tijaabada lama kala soocin; cilmi-baarayaashuna waxay ka warqabeen qoondaynta inta lagu jiray tijaabada iyo qiimeynta natiijada. Cabbirrada muunadaha waxaa lagu bixiyay sheekooyinka jaantusyada iyo faylasha xogta ceeriin.

 

Waqtiga boostada: Abriil-15-2025